第七章
皮肤的组织病理学改变
皮肤的组织病理变化和其他器官组织的变化基本相同或相似,也可有炎症、充血、贫血、萎缩、肥厚、变性及发生肿瘤。因为皮肤特殊的组织结构而致其组织病理变化亦有自己的特点。皮肤病种类繁多,特殊的组织病理变化常有助于确定诊断。皮肤的组织病理变化也可以反映器官或全身的活动状态。本章按皮肤不同组织部分描述其基本病理变化。
一、表皮的组织病理变化
(一)角化过度
在疾病情况下,角质层较同一部位正常角质层显著增厚,称为角化过度(hyperkeratosis)。角质层由角质形成细胞产生的角蛋白构成,该层失去活力,不含细胞核,细胞间没有界限,嗜酸性染色(图7-1)。角质也可充填于扩大的毛囊或汗管开口处形成栓塞状为毛囊角栓(follicular plug,图7-2)。
图7-1 角化过度
图7-2 毛囊角栓
角化过度可见于鱼鳞病及掌跖角化病等先天性疾病,也可见于胼胝及鸡眼等获得性皮肤病或继发于其他皮肤病。角化过度常伴下方的颗粒层肥厚,棘细胞层也常肥厚。寻常鱼鳞病虽有明显的角化过度,颗粒层却萎缩或消失。
(二)角化不全(parakeratosis)
角质层虽变厚但角化过程不完全,角质层内残留有固缩的细胞核,常伴有下方颗粒层减少或消失。角化不全多与表皮下部水肿和真皮浅层炎症致表皮细胞生长速度过快不能完全角化有关,常见于银屑病、玫瑰糠疹等(图7-3)。有时角化不全的角质层内白细胞及血清渗出而结成痂屑(图7-4),可见于湿疹及脂溢性皮炎等鳞屑性皮肤病。
图7-3 角化不全
图7-4 角化不全伴炎性渗出
(三)角化不良
角化不良(dyskeratosis)为表皮或附属器上皮的角质形成细胞未到达角质层即出现过早角化。颗粒层、棘细胞层及基底层被合称为马尔匹基层(Stratum malpigii),该层内个别或小群细胞过早角化或不能正常角化时失去桥粒,表现为均质化的嗜伊红小体,有固缩变小或残留的细胞核,称为角化不良(图7-5)。
图7-5 角化不良
角化不良可分两种:棘层松解性和肿瘤性角化不良。肿瘤性角化不良常见于鲍恩病、日光性角化病及鳞状细胞癌等,表现为肿瘤组织内单个、均质性、嗜伊红染色的小体,偶见残留的细胞核。棘层松解性角化不良常见于毛囊角化病、家族性良性天疱疮、疣状角化不良瘤等,表现为圆体或谷粒(corps round or grain)。
(四)棘层肥厚
表皮棘细胞层增厚,棘细胞数量增加,表皮突增宽延长(图7-6)。如真皮乳头不规则上升,皮肤表面凸凹不平呈波浪状起伏,表皮轻微不规则增生肥厚则形成乳头瘤样增生(papillomatous hyperplasia)(图7-7),常见于疣状痣、寻常疣、日光性角化病、脂溢性角化病、黑棘皮病等。
图7-6 棘层肥厚
图7-7 乳头瘤样增生
表皮或附属器上皮不规则增生,棘层高度肥厚,表皮突不规则下延,与上皮瘤相似,则称为假上皮瘤样增生(pseudo-epitheliomatous hyperplasia),细胞异型性不明显,常见于疣状皮肤结核、孢子丝菌病等慢性肉芽肿性疾病。
(五)棘层松解
表皮细胞细胞间桥变性,棘细胞失去紧密连接而呈松解状态,细胞不能互相连接而出现表皮内裂隙、水疱或大疱,变性的表皮细胞单独或成群地漂泊于疱液内(图7-8)。棘层松解(acantholysis)致表皮内裂隙或水疱形成,真皮乳头上覆一层基底细胞,呈指状或墓碑状伸入疱腔内,形成绒毛(villi)(图7-9)。原发性棘层松解见于天疱疮、家族性良性天疱疮、暂时性棘层松解性皮病、毛囊角化病等。继发性棘层松解是由于细胞本身改变或受损而松解,常见于病毒性水疱,脓疱疮、角层下脓疱性皮病等。乳头状汗腺腺囊瘤及乳头状汗腺瘤的组织内也可见绒毛。
图7-8 棘层松解
图7-9 绒毛
(六)表皮水肿
表皮水肿分为细胞间水肿(intercelluar edema)及细胞内水肿(intracelluar edema)。
1.细胞间水肿
表皮细胞间液体增加而使细胞间距变宽,细胞间桥拉长在显微镜下明显易见似海绵状(图7-10),又称为海绵形成(spongiosis)。严重的细胞间水肿致表皮内水疱形成,常见于皮炎湿疹类炎性疾病。
图7-10 细胞间水肿
2.细胞内水肿
棘细胞肿大,胞质透明,细胞核发生凝缩,细胞可呈鸟眼状(图7-11),严重者细胞膨胀破裂,残留的细胞膜连接成网状,发展为多房性水疱,即网状变性(reticular degeneration)(图7-12),往往和海绵形成同时存在于急性或亚急性皮炎的表皮内。
图7-11 细胞内水肿
图7-12 网状变性
带状疱疹、水痘及单纯疱疹等病毒性疾病表皮细胞变性而成气球细胞(balloon cell)漂浮于疱液内。细胞大而圆,没有细胞间桥,细胞质均匀,略嗜酸性,细胞核大而不规则,单核或多核,染色深。
基底细胞的水肿变性(hydropic degeneration of basal cells)又称为基底细胞液化变性(liquefaction degeneration of basal cells),基底层排列紊乱或模糊不清,甚至见不到,细胞间及其下方乳头层真皮水肿,真皮的炎性细胞进入表皮,致真表皮的界限不清(图7-13)。常见于红斑性狼疮、扁平苔藓等。
图7-13 基底细胞液化变性
色素失禁(incontinence of pigment)是由于基底细胞液化变性,黑色素脱落于真皮浅层并为巨噬细胞所吞噬,常见于色素失禁症、扁平苔藓、红斑性狼疮及固定性药疹等病。
(七)微脓肿
银屑病角化不全的角质层内或其下方常有中性粒细胞聚集而成Munro微脓肿(图7-14)。连续性肢端皮炎、脓疱性银屑病、疱疹样脓疱病及Reiter综合征的表皮内有海绵状脓疱,在棘层上部海绵水肿基础上,在海绵水肿的网格内有大量的中性粒细胞聚集,即Kogoj微脓肿(图7-15)。在蕈样肉芽肿表皮或附属器上皮下部可见异型淋巴细胞构成的Pautrier微脓肿(图7-16)。
图7-14 Munro微脓肿
图7-15 Kogoj微脓肿
图7-16 Pautrier微脓肿
(八)萎缩
表皮因各层细胞减少而变薄,表皮突变平或消失,在显微镜下如一条直带(图7-17)。真皮往往同时变薄,皮脂腺及汗腺也常缩小,甚至消失。
图7-17 萎缩
(九)肿瘤
同一型细胞的细胞形态不同时称为多形性(polymorphism),不典型细胞核呈未分化状态时被称为间变(anaplasia)。细胞核的形态不规则,深染伴有丝分裂相,为恶性肿瘤或恶变的表现(图7-18)。表皮肿瘤如角化棘皮瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、Bowen病及Paget病等起源于表皮。毛发上皮瘤、汗腺癌及皮脂腺癌等起源于皮肤附属器上皮。
图7-18 间变
(十)其他
皮肤糜烂时部分表皮缺失,溃疡时则完全缺失。痂一般由角质层及渗出的血浆、纤维蛋白、炎性细胞及变性的上皮细胞等杂物凝固而成。表皮色素变化(图7-19、图7-20)包括色素增多(hyperpigmentation)及色素减少(hypopigmentation)。扁平苔藓及红斑狼疮皮损的表皮下部或真皮上部可见均一红染的圆形或卵圆形胶样小体(colloid body),是由表皮细胞凋亡而成,可由表皮脱落至真皮内。
图7-19 色素增多
图7-20 色素减少
二、真皮的组织病理变化
(一)结缔组织的变化
1.胶原纤维
真皮中结缔组织主要由胶原纤维构成。皮肤萎缩时真皮胶原纤维常和表皮及皮肤附件同时萎缩。在肥厚型瘢痕或瘢痕疙瘩等胶原增生性疾病中胶原纤维则显著肥厚。
在创伤和溃疡愈合或慢性炎症过程中,早期组织内含有大量新生毛细血管及淋巴细胞、浆细胞及巨噬细胞等浸润时称为肉芽组织(granulation tissue),随后成纤维细胞增多及大量胶原纤维生成而致纤维化(fibrosis)。
纤维蛋白样变性(fibrinoid degeneration)主要由α及γ球蛋白构成的纤维蛋白和变性的基质结合后,成为纤维蛋白样物质而沉积于胶原束间。纤维蛋白样变性常见于皮肤慢性炎症或皮肤组织长期中毒、变应性血管炎、硬皮病及红斑性狼疮等结缔组织病等。黏液变性(mucinous degeneration)是由于酸性黏多糖等构成的黏蛋白沉积于胶原束间,PAS染色阴性,胶样铁及甲苯胺蓝染色阳性,常见于成人硬肿病、胫前黏液性水肿等。胶样变性(colloid degeneration)是由染色均匀且半透明的嗜酸性胶质沉积于胶原束所致。胶样粟丘疹的胶质可由纤维细胞合成,而幼年性胶样粟丘疹的胶质是来自表皮细胞。淀粉样变性(amyloid degeneration)是球蛋白和黏多糖等所构成的淀粉样蛋白形成的无定形嗜酸性半透明物质,通常存在于皮肤淀粉样变的真皮乳头中。
某些代谢物可沉积于结缔组织中,黄瘤病的类脂质存在于巨噬细胞的细胞质内,类脂质渐进性坏死的类脂质沉积于细胞外,而类脂质沉着病的类脂质同时存在于细胞内及细胞外。皮肤钙沉着病的钙盐呈无定形的嗜碱性颗粒,片状或块状沉积于胶原束间。
胶原纤维可因烧灼、化学品腐蚀、毒物强烈刺激或血管闭塞而发生坏死。渐进性坏死(necrobiosis)是结缔组织及成纤维细胞染色模糊不清,细胞核不完整或消失,纤维束的结构仍存在或隐约可见。渐进性坏死区的外围常有栅状排列的成纤维细胞及上皮样细胞,常见于类脂质渐进性坏死、环状肉芽肿及风湿性结节等。
干酪样坏死(caseation necrosis)或局部缺血性坏死(ischemic necrosis)的坏死组织呈嗜酸性淡染无定形颗粒状物质,可见于梅毒性树胶肿、干酪样变性及皮肤结核。不完全干酪样坏死区内细胞核固缩变形而有核固缩(pyknosis),或细胞核碎裂形成核尘而称为核碎裂(karyorrhexis)。
2.弹力纤维
弹力纤维是坚韧的结缔组织,在急性炎症时不受影响。但在皮肤结核、梅毒性树胶肿及麻风结节等慢性肉芽肿内,弹力纤维易变性及破坏消失。变性的弹力纤维粗厚卷曲、断裂,甚至呈颗粒状,嗜碱性染色。弹力过度皮肤的真皮组织内,弹力纤维增多。大疱性表皮松解的皮损内弹力纤维缺乏。弹力纤维性假黄瘤等疾病的弹力纤维明显变性。
3.网状纤维
网状纤维在类肉瘤内大量增多,在淋巴瘤、蕈样肉芽肿、红斑狼疮、黄色瘤及梅毒性树胶肿内也较多见,但网状纤维不见于黏液性水肿、淀粉样变、黑棘皮病、血管角化瘤、瘢痕瘤、毛囊角化瘤、传染性软疣、神经纤维瘤及汗管瘤内。
(二)血管的变化
血管扩张时管腔扩大,管腔内红细胞增多。血管收缩时皮肤贫血而苍白。血管因发炎而扩张时周围常伴有炎细胞浸润。
血管壁的渗透性增加时真皮可发生水肿而致结缔组织疏松,尤以乳头层真皮水肿最为明显,常见于荨麻疹、血管性水肿及各种急性炎症性皮肤病。
红细胞逸出血管进入周围组织为出血,可由于血管受伤破裂或血管壁渗透性增加,以及血液成分改变或凝血功能障碍所致,常见于变应性血管炎、维生素C缺乏及血小板减少性紫癜等。在早期可见红细胞散布于血管附近,而陈旧性出血组织内不见红细胞,但有褐色含铁血黄素颗粒沉积。
血管内膜或内皮细胞过度增生可使管腔狭窄,甚至闭塞,局部组织因缺血可发生坏死。有时血管管腔闭塞是由于血栓形成或异物栓子,管腔内可见血栓或瘤栓等。
(三)色素的变化
真皮的色素一般是来自表皮的黑素细胞,组织细胞吞噬脱落的黑色素颗粒形成噬黑素细胞(图7-21)。常见于恶性黑素瘤、色素痣及Riehl黑变病。有时真皮内色素沉着来源于含铁血黄素(图7-22)、文身染料以及异物等。
图7-21 噬黑素细胞
图7-22 含铁血黄素
(四)肿瘤
真皮的良性瘤包括血管瘤、纤维瘤、神经纤维瘤、肌瘤及骨瘤等。有时,一种组织转化成另一种组织而被称为化生(metaplasia),较易出现于良性肿瘤,例如,毛母质瘤内可有骨生成(骨化)。真皮的恶性肿瘤包括恶性黑素瘤、鳞状细胞癌、基底细胞癌及各种肉瘤等,原发于皮肤或由其他器官转移到皮肤。
(五)细胞浸润
真皮内有炎症或某些其他病理变化时,常有数量不等的浸润细胞出现于血管(图7-23)或皮肤附属器周围。细胞浸润(cellular infiltration)可以聚集成群而成灶性浸润,也可弥漫散布于真皮内或侵入表皮,有时皮下脂肪层也有浸润。
图7-23 血管周围淋巴细胞浸润
浸润细胞可多形性(polymorphism),包括起源于骨髓的粒细胞类(granulocytic group),淋巴细胞类(lymphocytic group)及单核细胞类(monocytic group),起源于间叶组织的成纤维细胞及肥大细胞等。
(六)其他
真皮病理改变还有水肿、萎缩及表皮下水疱或大疱等,皮脂腺可以肥大或萎缩,汗腺也可有汗腺管扩张等改变。
三、皮下组织的组织病理变化
皮下组织又称为皮下脂肪层,由含有大量脂肪细胞的脂肪小叶及含有少量血管神经的纤维性间隔构成。皮下脂肪层发生炎症时为脂膜炎(panniculitis),可有浸润、水肿、变性、液化或坏死等组织变化(图7-24);脂肪细胞变性坏死后释放的脂质常被组织细胞吞噬;脂肪分解产物也可引起异物反应。脂肪细胞可萎缩变性而引起皮下组织萎缩,细胞浸润及增生的纤维组织可发生良性或恶性肿瘤。
图7-24 脂膜炎
四、浸润的细胞种类及形态
(一)粒细胞类
骨髓干细胞分化成中性、嗜酸性及嗜碱性早幼粒细胞后,经早幼粒细胞及晚幼粒细胞阶段而分化为成熟的粒细胞后进入血液。
1.中性粒细胞(neutrophilic granulocyte)
细胞呈圆形,细胞质内的中性颗粒所含溶酶体,可释放水解酶以消化内源性或外源性物质(图7-25)。中性粒细胞有吞噬及消化细菌的能力,也能消除抗原抗体复合物。在变应性血管炎的组织内,中性粒细胞核可发生核碎裂而为核尘(nuclear dust)。
图7-25 中性粒细胞
2.嗜酸性粒细胞(eosinophilic granulocyte)
细胞呈圆形,细胞质内有较粗大的嗜酸性颗粒,细胞核单叶或分两叶(图7-26)。嗜酸性粒细胞不能吞噬细菌,但有吞噬抗原抗体复合物及肥大细胞颗粒的作用,常见于湿疹、药疹、变应性接触性皮炎等过敏性疾病,也出现于嗜酸细胞肉芽肿、蕈样肉芽肿、淋巴瘤样丘疹病、大疱性类天疱疮及增殖性天疱疮等。
图7-26 嗜酸性粒细胞
3.嗜碱性粒细胞(basophilic granulocyte)
参与速发型及迟发型过敏反应,细胞质内嗜碱性颗粒可释放组胺及肝素等物质。除了变应性接触皮炎外,在皮肤病理组织中少见。
图7-27 淋巴细胞
(二)淋巴细胞
淋巴细胞(lymphocyte)的细胞质较少,细胞核染色较深(图7-27)。T淋巴细胞及B淋巴细胞都是免疫活性细胞,分别参与细胞免疫及体液免疫反应。周围血液中还有杀伤靶细胞的NK细胞。淋巴细胞常见于多种皮肤损害内,且多数是能够移动并具有较弱吞噬能力的小淋巴细胞,在皮肤慢性炎症中多半是未致敏细胞。
(三)浆细胞
浆细胞(plasma cell)呈圆形、卵圆形或梨形,细胞质丰富,边缘清楚,细胞核内有较粗的染色质颗粒(图7-28)。浆细胞是B淋巴细胞受抗原刺激后转化而成,产生抗体(免疫球蛋白)参与体液免疫反应,常出现于各种慢性炎症,如梅毒、腹股沟肉芽肿、皮肤利什曼病及鼻硬结病等。
图7-28 浆细胞
(四)单核细胞、组织细胞、上皮样细胞、多核巨细胞、肉芽肿
骨髓中占少数的单核母细胞分化成单核前细胞,成熟后进入血液而为单核细胞,以后进入组织而发展成巨噬细胞(组织细胞)、上皮样细胞及多核巨细胞。
1.单核细胞(monocyte)
单核细胞在血液中和淋巴细胞容易区别,但进入组织后,和淋巴细胞的形态基本相同。单核细胞的细胞质不多,细胞核小而圆且染色较深,因而和淋巴细胞一同被称为淋巴样细胞(lymphoid cell),但单核细胞含有溶酶体能释放水解酶,通过酶染色及电镜检查可以区分。接触性皮炎损害真皮内淋巴样细胞多半是单核细胞。
2.组织细胞(histiocyte)
单核细胞在组织内分裂繁殖而成为具有移动及吞噬功能的不成熟巨噬细胞(macrophage),在吞噬微生物、破坏的组织或细胞、代谢产物或某些异物后变为成熟的巨噬细胞。
在皮肤组织内,巨噬细胞被称为组织细胞,其他如肝脏的库普弗细胞、神经的小胶质细胞、脾脏的血窦附壁细胞都是巨噬细胞,是体液免疫和细胞免疫的主要参与者。
组织细胞吞噬各种致病菌后由细胞质内溶酶体酶溶解消化,也能吞噬较大的微生物如荚膜组织胞浆菌及利什曼原虫等。组织细胞还能吞噬处理抗原性物质并递呈给淋巴细胞。黄瘤病及瘤型麻风等的泡沫细胞是含有大量类脂质的组织细胞,某些黑变病的噬黑素细胞是组织细胞吞噬大量黑素颗粒而成。
组织细胞核淡染,呈圆形或卵圆形,核膜清楚,而细胞质多不明显(图7-29)。
图7-29 组织细胞
3.上皮样细胞(epithelioid cell)
由组织细胞转变而来,细胞质丰富而轻度嗜酸性。上皮样细胞吞噬力减弱或完全消失,细胞往往聚集成群,没有清楚的细胞膜但有伪足样胞突,细胞之间一般没有明确的分界。细胞核形态和组织细胞相同或略大(图7-30)。
图7-30 上皮样细胞
上皮样细胞是由组织细胞在吞噬消化微生物后或在消除不能消化的异物或代谢产物后转化而成。上皮样细胞常见于免疫性肉芽肿性疾病如再感染的肺结核病、结核样型麻风及晚期梅毒等,而这些感染性肉芽肿中微生物已经极少或几乎没有。上皮样细胞肉芽肿更常见于类肉瘤,且为该病的组织学特征。变应性肉芽肿,如铍肉芽肿等也含有上皮样细胞。
4.多核巨细胞(multinucleated giant cell)
成熟的巨噬细胞分裂趋势下降,可以互相融合而成多核巨细胞,可比一般细胞大数倍。细胞质嗜酸性染色并有清楚的边界,细胞核有多个,甚至多达数十或数百。
多核巨细胞往往出现于异物性及变应性肉芽肿。异物巨细胞(foreign body giant cell)可出现于脂肪肉芽肿、痛风及钙沉着等代谢产物附近或类脂质渐进性坏死等坏死组织处,多个细胞核在细胞质内杂乱排列成团(图7-31)。朗汉斯巨细胞(langhans giant cell)往往与上皮样细胞出现于皮肤结核病及类肉瘤病等皮损内,细胞核在靠近细胞边缘的细胞质内排列成弧形或马蹄形(图7-32)。此外,还有核排列略似朗汉斯巨细胞但又不太规则的过渡型。上述三种细胞核排列有所不同的多核巨细胞往往同时出现于组织病理切片内。
图7-31 异物巨细胞
5.肉芽肿(granuloma)
是以上皮样细胞和多核巨细胞浸润为特点的慢性增殖性炎症。炎症局部组织慢性增生,除了含有淋巴细胞、单核细胞及巨噬细胞外,还常有上皮样细胞或多核巨细胞或两者都有。此外,常伴有血管渗透性增加,血管内皮细胞和成纤维细胞增生等变化。陈旧性损害内结缔组织往往大量增生。
异物肉芽肿(foreign body granuloma)常含有巨噬细胞及多核巨细胞,而上皮样细胞基本不见或很少,通常由异物进入皮肤后不能消化和清除而由细胞包围所致,常见于硅化物或淀粉等异物、锆及铍类工业原料、不适合的义齿及文身染料等长期刺激所致。内源性产物如尿酸盐及角蛋白等进入皮肤也能引起异物肉芽肿。
图7-32 朗汉斯巨细胞
变应性肉芽肿(allergic granuloma)含有较多上皮样细胞,也常见多核巨细胞,后者通常为朗汉斯巨细胞,但也可有异物巨细胞。变应性肉芽肿被认为是机体对微生物或异物的迟发型变态反应,包括微生物如结核杆菌、麻风杆菌、螺旋体及深部真菌,异物如锆、铍及文身染料等,另有原因不明的结节病及变应性肉芽肿等特发性肉芽肿。
变应性肉芽肿内上皮样细胞及多核巨细胞几乎没有吞噬能力,但其所分泌溶酶体酶及水解酶可消除微生物。如果被吞噬物的毒力太强致使巨噬细胞崩解死亡,释出的吞噬物又可吸引其他巨噬细胞,并使其转变为上皮样细胞及多核巨细胞。此外,肉芽肿内还可有淋巴细胞、浆细胞及嗜酸性或中性粒细胞浸润,细胞种类及数量因疾病不同而有差异。皮损痊愈时往往遗留纤维变性及瘢痕形成。
(五)肥大细胞
肥大细胞(mast cell)有圆形或卵圆形核,细胞呈梭形、立方形或纺锤形,细胞质中有异染性嗜碱性颗粒。HE染色颗粒不显色,细胞质呈淡红色。用吉姆萨或甲苯胺蓝染色常可见异染的紫红色颗粒。因此,肥大细胞在正常真皮内虽有少量存在,常难以和成纤维细胞区别(图7-33,图7-34)。
图7-33 肥大细胞甲苯胺蓝染色
图7-34 肥大细胞吉姆萨染色
肥大细胞内异染性颗粒和嗜碱性粒细胞的颗粒相似,这两种细胞都参与速发型及迟发型过敏反应,如变应性接触性皮炎组织内先出现嗜碱性粒细胞,以后肥大细胞逐渐增加。
肥大细胞表面有IgE的Fc受体,因而可吸附并结合IgE型特异型抗体,抑制细胞膜的腺苷环化酶(adenyl cyclase),使细胞内环磷腺苷减少,从而促使肥大细胞脱颗粒,释出组胺等介质后引起血管扩张、毛细血管渗透性增加、平滑肌收缩,甚至过敏性休克等。
肥大细胞增多是包括色素性荨麻疹在内的肥大细胞增生性疾病的主要病理特征。在变应性接触性皮炎、异位性皮炎、扁平苔藓、神经纤维瘤、红斑狼疮以及愈合伤口的肉芽组织内肥大细胞也增多,但在组织病理学诊断方面意义不大。
五、皮肤病理学常用的特殊染色
皮肤组织标本最常用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin stain, HE),细胞核染成蓝色,细胞质、胶原、神经组织等染成红色。HE染色可以满足大部分皮肤疾病的组织病理学诊断要求,但当需要确定某些特殊物质、病原体等的性质时,则应该进行特殊染色。
1.淀粉样物质(amyloid stain)
淀粉样蛋白在HE染色为有裂隙的无定形嗜伊红均质物,裂隙是由于制片过程中淀粉样蛋白收缩所致。淀粉样蛋白常用刚果红和甲紫染色,刚果红染色见砖红色团块状物质(图7-35),于偏振光下呈苹果绿色。甲紫染成紫红色。
图7-35 刚果红染色
2.黏液染色(mucin stain)
皮肤组织在某些生理或病理情况下黏液样物质增多,根据其所含有酸基的不同,分为中性、酸性和混合性黏多糖。皮肤组织中主要为酸性黏多糖。临床诊断过程中多用阿新蓝(alcian blue)和胶样铁(colloidal iron)染色显示酸性黏多糖,表现为真皮胶原束间蓝色的云雾状物质(图7-36)。
图7-36 阿新蓝染色
3.肥大细胞染色(mast cell stain)
肥大细胞来源于真皮未分化的间充质细胞,呈梭形、立方形或纺锤形。细胞质中有异染性嗜碱性颗粒,HE染色不显色。用吉姆萨染色或甲苯胺蓝染色(toluidine blue)可见细胞内异染的紫红色颗粒(图7-37)。
图7-37 甲苯胺蓝染色
4.糖原染色(glycogen stain)
过碘酸-希夫(PAS)染色是最常用的皮肤组织糖原染色方法,常用于真菌感染及皮肤糖原含量增多性皮肤病的诊断(图7-38)。
图7-38 PAS染色
5.弹力纤维染色(elastic fibers stain)
弹力纤维缠绕在胶原束之间,由含有丰富二硫键的弹性蛋白组成,经Verhoeff-Van Gieson染色呈棕黑色(图7-39)。
图7-39 弹力纤维染色
6.黑素染色(melanin stain)
黑素颗粒存在于表皮的基底部位,在某些病理情况下,黑色素分布异常可以用Fontana-Masson染色来显示,呈棕黑色(图7-40)。
图7-40 Fontana-Masson染色
7.抗酸染色(acid-fast bacillus stain)
结核、麻风等抗酸杆菌感染时需用抗酸染色以确诊。由于菌体含有糖脂的蜡质外壳与苯酚碱性复红形成的复合物,抗酸脱色致杆菌被染成红色(图7-41)。
图7-41 抗酸染色
8.铁染色(iron stain)
临床应用普鲁士蓝染色(Perls stain)来区分黑色素和含铁血黄素,后者的铁离子和普鲁士蓝反应呈深蓝色(图7-42)。
图7-42 Perls染色
9.细菌染色(bacteria stain)
Brown-Hopps染色法将革兰氏阳性球菌染成蓝色,阴性杆菌染成红色(图7-43)。
图7-43 Brown-Hopps染色
10.真菌染色(fungi stain)
常用的真菌染色包括PAS以及六胺银(Gomori’s methenamine silver nitrate stain, GMS)染色。GMS染色将真菌细胞壁染成灰黑色(图7-44)。
图7-44 GMS染色
11.螺旋体染色(spirochete stain)
常用的螺旋体染色包括Warthin-Starry银染色及Steiner染色,常用于临床梅毒及莱姆(Lyme)病的病原体检测(图7-45)。
图7-45 Steiner染色
六、皮肤病理学常用的免疫组织化学染色
免疫组织化学又称为免疫细胞化学,是应用带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等进行定位检测的方法。在皮肤病理研究中,主要用于皮肤肿瘤组织类型和细胞来源的鉴别,包括恶性黑素瘤、肉瘤、癌、淋巴瘤以及神经源性肿瘤。皮肤免疫组织化学染色常用的抗体包括针对上皮组织(epithelial markers)、间叶组织(mesenchymal markers)、神经外胚叶组织(neuroectodermal markers)及造血组织(hematopoietic markers)等的标志物。
1.上皮组织标志物
皮肤病理学诊断常用的上皮组织标志物包括角蛋白(cytokeratin, CK)、上皮膜抗原(epithelial membrane antigen, EMA)及癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)等。
(1)角蛋白:
是最复杂的中间丝蛋白家族成员,存在于所有的上皮细胞。角蛋白包括20余种蛋白成分,分为酸性和碱性角蛋白亚家族,也可根据其表达于复层或单层上皮进行分类。根据分子量不同分为低分子量(CK8,CK18,CK19)和高分子量角蛋白(CK1,CK5,CK10,CK14),通常用于上皮和非上皮来源肿瘤的鉴别。皮肤组织病理学诊断常用的检测角蛋白的标志物包括角蛋白(Pan CK),CK7,CK20,CAM5.2,AE1/AE3等(图7-46)。
图7-46 Pan CK
(2)上皮膜抗原(EMA):
属于人类黏蛋白家族,存在于人体各种上皮细胞中,其分布与角蛋白相似。EMA可作为上皮源性肿瘤的标志物,阳性表达于鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌等。EMA对内脏上皮源性肿瘤的敏感性优于表皮源性肿瘤,同样在腺癌中的表达高于鳞癌。皮肤组织病理学诊断中常用于皮脂腺,汗腺肿瘤的标记,佩吉特病和乳腺外佩吉特病可阳性表达(图7-47)。
图7-47 EMA
(3)癌胚抗原(CEA):
为存在于结肠癌及胚胎结肠黏膜上皮细胞的一种糖蛋白,由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝细胞所合成。在妊娠前6个月内CEA含量增高,出生后血清中含量低下。作为常用的肿瘤标志物,CEA升高常见于肺、消化道及胰腺来源的肿瘤。皮肤组织病理学诊断中常用于汗腺肿瘤,佩吉特病和乳腺外佩吉特病以及腺癌的标记(图7-48)。
图7-48 CEA
2.间叶组织标志物
皮肤病理学诊断常用的间叶组织标志物包括波形蛋白(vimentin),平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin, SMA),CD34,CD31,结蛋白(desmin)以及Ⅷ因子相关抗原等(图7-49)。
图7-49 CD34
3.神经外胚层组织标志物
皮肤病理学诊断常用的神经外胚层组织标志物包括S-100,HMB-45,melan A/mart-1及SOX10等(图7-50)。
图7-50 S-100
4.造血组织标志物
皮肤病理学诊断常用的造血组织标志物包括CD45Ra(LCA)、CD45Ro、CD20、CD3、CD4、CD8、CD5、CD30(Ki-1/BERH2)、CD7、CD56、CD68、kappa/lambda、CD1a及BCL-2等(图7-51,图7-52)。
图7-51 CD20
图7-52 CD1a
5.细胞增殖性标志物MIB-1(Ki-67)
为分子量360KD的核抗原,表达于任何进入增殖期的细胞,因而可用于对肿瘤良恶性的鉴别(图7-53)。
图7-53 Ki-67
(单士军)